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類器官培養(yǎng)操作步驟有哪些?

更新時間:2023-09-19 15:04:16       點擊次數(shù):687

類器官制備的典型方法首先需要分離胚胎或多能干細胞,然后將它們培養(yǎng)在支持介質(zhì)(如Matrigel等基質(zhì)膠)上,以促使其三維生長。類器官中含有多種已分化的細胞類型,這些細胞類型在體內(nèi)相應(yīng)的器官中也存在。例如,Sato等人報道的小腸類器官模型中可以觀察到小腸上皮的所有細胞類型[3]。制導(dǎo)類器官形成的信號通路與體內(nèi)器官發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的信號通路相同,因此,在培養(yǎng)基中需要添加細胞因子、生長因子和小分子,以激活或抑制參與類器官形成的特定信號通路。不同類型的類器官制備需要使用不同的添加物組合,即使是對于結(jié)構(gòu)非常相似的組織,如小腸和結(jié)腸,其添加物組合也會有所不同[4]


在類器官的培養(yǎng)中,存在多種不同的方法,其中一些方法目前仍在初探階段。下文將提供一些類器官培養(yǎng)的實例,并重點介紹細胞因子、生長因子和小分子在這些方法中的應(yīng)用。


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