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小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞的種植

更新時(shí)間:2023-09-11 17:13:19       點(diǎn)擊次數(shù):686

1.  C57小鼠,雌性, 10周, 通過(guò)頸椎脫臼處死小鼠,浸入75%乙醇浸泡5分鐘,轉(zhuǎn)移到通風(fēng)柜中的解剖盤(pán)中。

 

2. 打開(kāi)皮膚,暴露、收集股骨,無(wú)菌狀態(tài)下移除附著的肌肉和組織。

 

3. 轉(zhuǎn)移股骨至預(yù)冷含雙抗的PBS中浸泡,洗滌三次,冰上操作。

 

4. 切斷股骨骨骺,使用3ml 種植液1ml注射器沖洗,沖洗液由棕色變成粉紅色即可。

 

5. 收集沖洗液,計(jì)數(shù) 

6. 用種植液(DMEM+10%FBS+20%L929細(xì)胞上清液+1%雙抗)稀釋細(xì)胞, 種在3個(gè)10cm皿中,37度細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

 

7. 培養(yǎng)6天的巨噬細(xì)胞。

 

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