裸鼠成瘤實驗是從體外細胞試驗到動物水平體內(nèi)試驗,是基因功能研究的重要飛躍。動物實驗,由于其更能模擬人類的生理和病理條件,在科研上,動物實驗獲得的結(jié)果,將有更強的說服力。腫瘤研究中,最常規(guī)的動物實驗就是裸鼠成瘤實驗。由于大部分腫瘤研究使用的是人類細胞,所以由于異種排斥的存在,我們需要免疫缺陷型小鼠來作為移植瘤模型的載體,通過對該小鼠的注射腫瘤細胞,使其成瘤,觀察流體的生長來判斷其生物學(xué)變化。
病理實驗檢測技巧:
??????1. 預(yù)實驗。通過查文獻看看要用的細胞系能不能成瘤,注射的細胞數(shù)量,注射條件等,查完以后做一次預(yù)實驗,設(shè)置幾個細胞量的梯度,看看文獻報道的是不是可行。一般預(yù)實驗注射5只小鼠。
2. 裸鼠成瘤受外界影響很大,裸鼠來源,鼠房環(huán)境,細胞狀態(tài)(尤其重要)。國內(nèi)的細胞系和鼠房條件都很多不可控,一定要小心。支原體對成瘤和藥物敏感性影響很大,細胞要無支原體,注射前細胞保持冰上。
3. 不成瘤的時候可以換NOD SCID小鼠或者干脆換細胞系。
4. 注射的時候一定要注意別打漏了或者打到肌肉里,這樣出來的瘤子體積一致性很差。我一般采用進針以后針尖向上挑,打的體積不超過200ul。
5. 小鼠周齡不要太大,一般控制在7周以內(nèi)。
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